在实验中，通常会将目标基因与一种荧光素酶（如海肾荧光素酶）连接，而另一种荧光素酶（如萤火虫荧光素酶）则作为内部对照。这种设计不仅提高了数据的可靠性，还允许在同一细胞或组织样本中同时监测多个变量的变化。
实验过程涉及构建含有目的序列的载体，并将其转染到宿主细胞内。随后，在特定条件下诱导目标基因表达，并通过添加相应底物来激发荧光素酶产生发光信号。最后，利用专门的仪器测量发光强度，并以此判断目标基因的功能状态及其对其他因素的影响。
双荧光素酶报告实验因其准确性高、操作简便以及适用范围广等特点，在分子生物学领域占据重要地位。无论是研究转录因子的作用机制还是探索药物开发中的新靶点，这项技术都展现出巨大潜力。
